滋养层和饲养层细胞的关系

2017-06-01

饲养层细胞就是指一些特定细胞经有丝分裂阻断剂处理后所得的细胞单层。那么滋养层和饲养层细胞的关系是什么?下面是小编精心为你整理的滋养层和饲养层细胞的关系,一起来看看。

滋养层和饲养层细胞的关系

1.滋养层细胞:

在胚胎发育成桑椹胚后,桑椹胚进一步发育,细胞开始出现分化。聚集在胚胎的一端,个体较大的细胞,称为内细胞团(inner cell mass,ICM),将来发育成胎儿的各种组织,而沿透明带内壁扩展和排列的,个体较小的细胞,称为滋养层细胞,它们将来发育成胎膜和胎盘。

所以做基因诊断时,通常取少量滋养层细胞诊断是否患有遗传病,这样不会影响胎儿发育.

2.饲养层细胞:

在正常机体内,细胞除了获得一些血液来的营养外,还在细胞与细胞之间互换特殊的物质,用于分裂分化和营养等。因而,在细胞体外培养中,除了正常的培养基外,先培养一层特殊的细胞,然后再在其上接种要实验的细胞,这样更能模拟体内环境。这些特殊的细胞就是饲养层细胞,通常是成纤维类细胞、输软管表皮细胞。

这些细胞可以提供实验细胞更好的营养,有的分化研究则是必须有饲养层细胞。

滋养层和饲养层细胞的影响因素

饲养层的影响,主要体现在饲养层种类、丝裂霉素处理滋养层的时间、饲养层细胞的代数和饲养层细胞的密度等。动物种类不同对饲养层种类的要求也不同。

饲养层种类

STO PMEF: 对各种动物都较适宜,,但最可靠的方法还是根据动物种类筛选最佳饲养层为宜。有研究表明,PMEF比STO更适合用于小鼠ES(胚胎干细胞)的培养。

UE(子宫上皮细胞)

BRL(大鼠肝细胞)等

动物种类

需要经过筛选来确定最适宜该种动物ES分离克隆的饲养层

丝裂霉素处理滋养层的时间

目前丝裂霉素(常用有丝分裂阻断剂)处理时间在小鼠成纤维细胞上一般要求为:在37摄氏度,5%二氧化碳饱和温度的条件下处理24h,时间过短达不到预定目的,成纤维细胞不能被成功地抑制住,时间过长则使细胞老化,活性下降,分泌因子的能力降低,从而直接影响ES细胞增殖和分化的抑制。同时处理完的清洗工作也很重要,一般要求用无钙镁PBS冲洗4~5遍,以确保丝裂霉素的彻底清除。

饲养层细胞的代数及密度

以小鼠成纤维细胞为例,选3~5代,密度为10^6-10^7个/ml为宜,代数过低所含杂细胞太多,代数过高则细胞活力降低。

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