饲养层细胞的特点是什么
2017-06-17
饲养层细胞通常是成纤维类细胞,这些细胞可以提供实验细胞更好的营养,有的分化研究则是必须有饲养层细胞。下面是小编精心为你整理的饲养层细胞的特点,一起来看看。
饲养层细胞的特点
在正常机体内,细胞除了获得一些血液来的营养外,还在细胞与细胞之间互换特殊的物质,用于分裂分化和营养等。因而,在细胞体外培养中,除了正常的培养基外,先培养一层特殊的细胞,然后再在其上接种要实验的细胞,这样更能模拟体内环境。这些特殊的细胞就是饲养层细胞,通常是成纤维类细胞,这些细胞可以提供实验细胞更好的营养,有的分化研究则是必须有饲养层细胞。
胚胎干细胞及其培养用饲养层细胞的制备方法
所述新型的小鼠胚胎干细胞及其培养用饲养层细胞的制备方法,饲养层细胞采用化学固定的方式制备。所述化学固定采用多聚甲醛(PA)作为固定剂。或者,所述化学固定采用戊二醛(GA)作为固定剂。整体培养过程包括如下步骤:
(1)准备注射前将胚胎干细胞接种到饲养层细胞上,贴合度满足后进行一次传代;
(2)注射前1天或注射当天将细胞用酶进行消化,然后离心收集细胞,吸出上清液后加培养基重悬;
(3)冷藏或直接注射。
进一步地,步骤中贴合度为80%。相比于生物培养法,化学固定法能够提供质量稳定的ES细胞,可反复使用,而且饲养层细胞在消化处理时不会随着ES细胞脱落。