什么是衣原体阴性 衣原体简介

2017-05-06

衣原体是一种革兰氏阴性病原体,是大自然非常广泛的一种病菌,主要分为沙眼衣原体和肺炎衣原体,鹦鹉热肺炎衣原体三类,一般在人体内和动物体内较为常见,那么什么是衣原体阴性呢?下面是小编整理的什么是衣原体阴性,欢迎阅读。

什么是衣原体阴性

衣原体阴性是指衣原体检查时阴性,结果:仅质控线(C)有一条红线,检测线(T)无红线出现。

衣原体是在临床上较为常见的致病菌,其属于典型的革兰氏阴性菌,也是致病性较强的微生物。虽然我们对于衣原体的名字很熟悉,但是对于其致病性和治疗方法却并不知晓。

人型支原体是支原体其中的一种,常在泌尿系统和生殖器官中存在,是能够造成泌尿生殖系统感染的一种病菌。单纯衣原体和支原体检测阳性多数不是病态,但是一旦确诊为人型支原体感染对人体危害很大。 支原体阴性是正常的,不用担心。如果通过检查出现阳性就说明有感染,那就需要治疗

衣原体简介

衣原体为革兰氏阴性病原体,是一类能通过细菌滤器、在细胞内寄生、有独特发育周期的原核细胞性微生物。过去认为是病毒,现认为是介于立克次体和病毒之间的微生物。衣原体广泛寄生于人类、鸟类及哺乳动物。能引起人类疾病的有沙眼衣原体、肺炎衣原体、鹦鹉热肺炎衣原体。

在自然界中分布很广泛。它有较复杂的、能进行一定代谢活动的酶系统,但不能合成带高能键的化合物必须利用宿主细胞的三磷酸盐和中间代谢产物作为能量来源,专性细胞内寄生。多呈球状、堆状, 有细胞壁,有细胞膜,属原核细胞。它是一类在真核细胞内营专性能量寄生的G-原核微生物,呈球形,直径只有0.3-0.5微米,它无运动能力,广泛寄生于人类、哺乳动物及鸟类,仅少数有致病性。具有独特的发育周期,并以二等分裂方式繁殖。

共同特征

1.体积大于病毒,约250~500nm(纳米),在光学显微镜下勉强可见。

2.含有DNA和RNA。

3.有细胞壁,过去认为无肽聚糖,但是最新研究结果表示

“肽聚糖”存在于复制中的“沙眼衣原体”内。

衣原体目(包括人类病原体“沙眼衣原体”在内的革兰氏阴性寄生生物)过去被认为是一个罕见的例外:它们编码负责“肽聚糖”生物合成的基因,对-内酰胺抗生素敏感,但试图检测衣原体“肽聚糖”的努力过去却一直没有成功。

现在,这个被称为“衣原体异常”的矛盾已被解决。利用一个新颖的“点击化学”(click chemistry)方法来通过D-氨基酸二肽探针标记“肽聚糖”的这项研究,显示“肽聚糖”存在于复制中的“沙眼衣原体”内。

只含微量的细胞壁,由二硫键连接的多肽作为支架。

4.对多种抗生素敏感。

5.具有一些酶类但不够完善,这些酶缺乏产生代谢能量的作用,要由宿主细胞提供,须严格胞内寄生。能在鸡胚卵黄囊膜、小白鼠腹腔和HeLa细胞组织培养物等多种活体内生长繁殖。

6.有独特发育周期,仅在活细胞内以二分裂方式繁殖。

7.对抑制细菌的抗生素和药物敏感。

衣原体Chlamydia以鹦鹉热病原体和沙眼病原体为代表的专性寄生性的微生物。最早是由宫川米次等(1935)从腹股沟淋巴肉芽肿患者的染色体中作为宫川小体而发现的,被命名为宫川氏体(Miyagawanella)(E.Brumpt,1938)。其后,相继又出现很多其它名称,例如作为立克次氏体的亲缘种被称为Rickettsiaformis、Neor-ickettsia等,也有作为病毒类而称之谓鹦鹅热和腹股沟淋巴肉芽肿病毒(psittacosislymphogranvlo-ma,virus,PLV)、鹦鹅热病毒群(Psittacosisvirusgroup)等,相当混乱。已按伯杰式分类法归为衣原体目(Chlamidiales,L.A.Pagei等,1971)。然而尚有许多不明之处。侵染粒子呈直径0.3微米的球形,可用光学显微镜看到;在被细胞壁和细胞膜包裹的细胞质中有核糖体;核酸同时含有DNA和RNA;已证明有葡萄糖代谢活性和蛋白质合成能力;在细胞液胞内增殖,不进入细胞质质内。侵染粒子通过吞噬作用进入细胞波胞内,转化成一般称为网状结构体的粒子。网状结构体通过分裂增殖,在浸染后期成熟为侵染粒子。因此,在增殖周期中,虽没有保持作为粒子的连续性的潜伏期,然而,由于没有证实网状结构体的侵染性,所以从外表看起来,有一个相当于潜伏期的时期。为此,如上所述,微生物。衣原体与细菌的主要区别是其缺乏合成生物能量来源的ATP酶,也就是说衣原体自己不能合成生物能量物质ATP,其能量完全依赖被感染的宿主细胞提供。并以二分裂方式进行增殖,能被抗生素抑制。衣原体属于原核类生物。图片说明:Giemsa染色,油镜(1000倍),见到一大单核细胞,包浆内有球形和椭圆形的包涵体。

生物学性状

1.发育周期与形态染色

衣原体在宿住主细胞内繁殖有特殊生活周期,可观察到两种不同的颗粒结构:(1)原体(elementarybody,EB)直径为0.2~0.4μm的小球形颗粒,有胞壁,内有核质和核蛋白体,是发育成熟的衣原体,为细胞外形式。Giemsa染色呈紫色,Gimenez染色呈红色。原体具有高度的感染性,在宿主细胞外较稳定,无繁殖能力,通过吞饮作用进入胞内,原体在空泡中逐渐发育、增大成为网状体。(2)网状体(reticulatebody,RB)或称始体(initialbody),EB通过吞饮作用进入胞内,由宿主细胞包围EB形成空泡,并在空泡内逐渐增大为RB。直径为0.5~1.0μm,圆形或椭圆形。电子致密度较低,无胞壁,代谢活泼,以二分裂方式繁殖。RB为细胞内形式,无感染性,Macchiavello染色呈蓝色。RB在空泡内发育成许多子代EB也称为包涵体。成熟的EB从宿主细胞中释放,在感染新的易感细胞,开始新的发育周期,整个发育周期约需48~72h.

2.培养特性

衣原体为专性细胞内寄生,不能用人工培养基培养,可用鸡胚卵黄囊及HeLa-299、BHK-21、McCoy等细胞培养。将接种标本的细胞培养管离心,促进衣原体粘附进入细胞;或在培养管内加入二乙氨乙基葡聚糖,以增强衣原体吸附于易感细胞,提高分离培养阳性率。

3.类型

根据抗原构造、包涵体性质和对磺胺敏感性,衣原体可分为沙眼衣原体、肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体三个种。沙眼衣原体有三个生物变种即沙眼生物变种、性病淋巴肉芽肿生物和鼠生物变种。其中沙眼生物变种有A、B、C、D、J、K、等血清型,性病淋巴肉芽肿生物变种有L1、L2、L3、L2a、四个血清。用单克隆抗体识别鹦鹉热衣原抗原可分为4个血清型。肺炎衣原体只有1个血清型。

4.抵抗力

衣原体耐冷不耐热,56~60度仅存活5~10min,在-70度可保存数年。0.1%甲醛液、0.5%石碳酸30min可杀死。75%酒精0.5min可杀死。对四环素、红霉素、螺旋霉素、强力霉素及利福平均很敏感。

致病性与免疫性

1、致病机理:衣原体能产生类似格兰阴性菌内的内毒素,静脉注射小白鼠,能迅速使动物死亡。体外试验提示,衣原体表面脂多糖和蛋白促进其吸附于易感细胞,促进易感细胞对衣原体的内吞作用,并能阻止吞噬体和溶酶体的融合,从而使衣原体在吞噬体内繁殖并破坏细胞。受衣原体感染的细胞代谢被抑制,最终被破坏。

2、疾病举例

(1)沙眼:由衣原体沙眼生物变种A、B、Ba、C血清型引起。主要经直接或间接接触传播,即眼~眼或眼~手~眼的途经传播。当沙眼衣原体感染眼结膜上皮细胞后,在其中增殖并在胞浆内形成散在型、帽型、桑椹型或填塞型包涵体。该病发病缓慢,早期出现眼睑结膜急性或亚急性炎症,表现流泪、有粘液脓性分泌物、结膜充血等症状与体征。后期转变成慢性,出现结膜瘢痕、眼睑内翻、倒睫、角膜血管翳引起的角膜损害,以致影响视力,最后导致失明。据统计沙眼居致盲病因的首位。1956年我国学者汤飞凡等人用鸡胚卵黄囊接种法,在世界上首次成功地分离出沙眼衣原体,从而促进了有关原体的研究。

(2)包涵体包膜炎:由沙眼生物变种D~K血清型引起。包括婴儿及成人两种。前者系婴儿经产道感染,引起急性化脓性结膜炎(包涵体脓漏眼),不侵犯角膜,能自愈。成人感染可因两性接触,经手至眼的的途径或者来自污染的游泳池水,引起滤泡性结膜炎又称游泳池结膜炎。病变类似沙眼,但不出现角膜血管翳,亦无结膜瘢痕形成,一般经数周或数月痊愈,无后遗症。

(3)泌尿生殖道感染:经性接触传播,由沙眼生物变种D~K血清型引起。男性多表现为尿道炎,不经治疗可缓解,但多数转变成慢性,周期性加重,并可合并附睾炎、直肠炎等。女性能引起尿道炎、宫颈炎等,输卵管炎是较严重并发症,导致女性不孕不育。该血清型有时也能引起沙眼衣原体性肺炎。

(4)性病淋巴肉芽肿:由沙眼衣原体LGV生物变种引起。LGV要通过两性接触传播,是一种性病。男性侵犯腹股沟淋巴结,引起化脓性淋巴结炎和慢性淋巴肉芽肿。女性可侵犯会阴、肛门、直肠,出现会阴~肛门~直肠组织狭窄

(5)呼吸道感染:由肺炎衣原体及鹦鹉热衣原体引起。肺炎衣原体引起急性呼吸道感染,以肺炎多见,也可致气管炎、咽炎等。鹦鹉热原为野生鸟类及家畜自然感染,也可经呼吸道传然给人类,发生呼吸道感染和肺炎。

(6)其他:免疫性衣原体感染后能诱导产生异性细胞和体液免疫。

免疫性

衣原体感染后能诱导产生异性细胞和体液免疫。但保护性不强,为时短暂,因此衣原体的感染常表现为持续感染,反复感染或隐形感染。有些衣原体抗原注入人皮后内可造成免疫病理损伤。

基因组特征

衣原体基因组大小在1.04Mb~1.23Mb 之间。其中沙眼衣原体D血清型基因组1.04Mb, G+C占41.3%, 另有1个7 493bp的质粒。整个基因组有894个编码蛋白的基因,存在特别强的DNA修复和重组系统,未发现前噬菌体基因。

抵抗力

衣原体对热敏感,在60℃仅能存活5~10分钟。衣原体耐冷,在-70℃可保存数年,冷冻干燥可保存30年以上。常用消毒剂也能迅速杀灭衣原体,如75%乙醇0.5分钟或2%来苏液5分钟均可将其杀死。红霉素、强力霉素和四环素等有抑制衣原体繁殖的作用。

抗原结构

根据细胞壁的不同成份,可分为属、种、型特异抗原。

1.属特异抗原:是衣原体属四种的共同抗原。位于胞壁,为脂多糖,类似革兰阴性菌的脂蛋白-脂多糖复合物。用补体结合试验检测。

2.种特异抗原:大多数衣原体的种特异抗原位于主要外膜蛋白(major outermembrane protein, MOMP)上。用补体结合试验和中和试验检测。

3.型特异抗原:为不同亚种的主要外膜蛋白抗原中的特异性成分。型特异性抗原差别的分子基础是由氨基酸可变区的顺序变化决定的。常用检测的方法是单克隆抗体微量免疫荧光试验(MIF)。

4.抗原变异:主要外膜蛋白抗原表位已发生变异,并易形成新的亚种。

感染症状

一、亚急性期常合并前列腺感染:患者常出现会阴部胀痛、腰酸、双股内侧不适感或在做提肛动作时有自会阴向股内侧发散的刺痛感。

二、生殖道感染:潜伏期为1-3周,典型的急性期症状与其他非淋病性的生殖泌尿系统感染相似,表现为尿道刺痛,不同程度的尿急及尿频、排尿刺痛,特别是当尿液较为浓缩的时候明显。尿道口轻度红肿,分泌物稀薄,量少,为浆液性或脓性,多需用力挤压尿道才见分泌物溢出,常于晨起尿道口有少量粘液性分泌物或仅有痂膜封口,或见污秽裤裆。

衣原体感染的危害

一、衣原体感染人体后,首先侵入柱状上皮细胞并在细胞内生长繁殖,然后进入单核巨噬细胞系统的细胞内增殖。由于支原体、衣原体在细胞内繁殖,导致感染细胞死亡,同时尚能逃避宿主免疫防御功能,得到间歇性保护。支原体、衣原体的致病机理是抑制被感染细胞代谢,溶解破坏细胞并导致溶解酶释放,代谢产物的细胞毒作用,引起变态反应和自身免疫。

二、泌尿生殖道感染支原体后,引起的疾病男性为非淋菌性尿道炎,女性主要为非淋菌泌尿生殖道炎。男性表现为尿道刺痒、烧灼感和排尿困难,少数有尿频。尿道口轻度红肿,分泌物稀薄,部分病人无症状。

三、当人体感染衣原体后,产生特异性的免疫,但是这种免疫力较弱,持续时间短暂,因此,支原体、衣原体感染容易造成持续,反复感染,以及隐性感染。细胞免疫方面,大部分活动性已治愈的衣原体患者,给予相应的抗原皮内注射时,常引起迟发型变态反应。这种变态反应可用淋巴细胞进行被动转移。

培养特性

衣原体为专性细胞内寄生。绝大多数能在6~8天龄鸡胚或鸭胚卵黄囊中生长繁殖,并可在卵黄囊膜内找到包涵体、原体和网状体颗粒。某些衣原体经一定接种途径可使小鼠感染,如鹦鹉热衣原体接种小鼠腹腔;性病淋巴肉芽肿衣原体接种小鼠脑内。

衣原体可在某些原代或传代细胞株中生长,如HeLa-299、BHK-21、McCoy或HL细胞株,比鸡胚培养更敏感。为提高分离培养阳性率,可通过离心或用X线照射细胞,使更多的衣原体吸附到易感细胞表面。

主要类型

已知的与人类疾病有关的衣原体有三种,分别是鹦鹉热衣原体、沙眼衣原体和肺炎衣原体。这三种衣原体均可引起肺部感染。鹦鹉热衣原体可通过感染有该种衣原体的禽类,如鹦鹉、孔雀、鸡、鸭、鸽等的组织、血液和粪便,以接触和吸入的方式感染给人类。沙眼衣原体和肺炎衣原体要在人类之间以呼吸道飞沫、母婴接触和性接触等方式传播。衣原体感染的实验室检查

1.衣原体细胞培养:对沙眼衣原体敏感的细胞株为McCoy细胞、Hela-229细胞和BHK细胞,最常用的是经放线菌酮处理的单层McCoy细胞,孵育后,用单克隆荧光抗体染色,可迅速诊断,但操作人员一定要熟练,需专业培养。培养法的敏感性为80%-90%,阳性即可确立诊断。

2.衣原体细胞学检查法:在感染细胞内可有衣原体的包涵体存在。从感染部位采取细胞标本作涂片,姬姆萨染色包涵体是蓝色或暗紫色,碘染色显示褐色。但敏感性差(40%),已较少采用。采用荧光素标记的抗衣原体单克隆抗体,来检测细胞涂片中的衣原体,使用较为方便,主要用衣原体外膜蛋白(MOMP)的单克隆抗体的商品试剂(MicoTrak,Pathfinder,Monofluor)。结果判断:要衣原体数>10个才能判为阳性。

按第9版Bergey's细菌性分类手册,衣原体在分类学上属于衣原体目(Chlamydiales)、下有衣原体科(Chlamydiaceae)、衣原体属(Chlamydia)。

现依据DNA的同源性和抗原构造将衣原体份为1属4种。即衣原体属(Chlamydiae)分为:沙眼衣原体(C. trachomatis)、肺炎衣原体(C. pneumoniae)、鹦鹉热衣原体(C. psittaci)和兽类衣原体(C. pecorum)。

对人致病的主要是前三种衣原体,其中以沙眼衣原体最多见。

其中沙眼生物变种有A~K,其间另增亚型Ba、Da和Ia,共14个血清型;性病淋巴肉芽肿生物变种有L1、L2、L2a、L3四个血清。用单克隆抗体识别鹦鹉热衣原抗原至少可分为8个血清型。肺炎衣原体只有1个血清型。

沙眼衣原体

硝酸纤维素膜,并和胶体金标记的另一抗衣原体脂多糖单克隆抗体及其他试剂和原料制成,应用胶体金免疫层析技术,采用双抗体夹心的形式建立的衣原体检测方法,用于女性宫颈和男性尿道中衣原体的检测。从而达到检测女性宫颈和男性尿道中衣原体的存在,临床辅助诊断衣原体感染,试验结果还需要临床医生结合患者症状、体征及其它检查结果进一步确定的目的。

检测方法

样本要求

取样的质量对沙眼衣原体的检测极为重要。沙眼衣原体的检测质量有赖于准确的样品收集技术,应使样品中含有大量的细胞成分而不只是体液。

宫颈样品:

使用消毒宫颈拭子,或消毒的亚麻、涤纶拭子。在取样前用另外的拭子或棉球将宫颈口外区域的黏液抹去,将取样拭子插入宫颈管内通过鳞柱状上皮交界处,直到几乎拭子头已看不到。旋转拭子15-20秒钟取出,不要碰到宫颈外及阴道壁。这样能保证得到更多的柱状上皮细胞,而沙眼衣原体主要寄生在柱状上皮细胞中。

宫颈样品也可用细胞刷(未提供)收集(注意:孕妇不可用此方法)。清洁宫颈口外后,将细胞刷插入宫颈管,通过鳞柱状上皮细胞交界处,停留2-3秒钟,旋转细胞刷两圈后取出,注意不要碰到阴道壁。

如果检测可以即刻进行,将取样后的拭子放入样品处理管中。

男性尿道样品:

尿道用拭子或细胞刷(未提供)可用于尿道取样。病人在取样前至少1小时内不要小便。

将拭子或细胞刷插入尿道2-4厘米,旋转3-5秒钟后取出。如果检测可以即刻进行,将取样后的拭子放入样品处理管中。

检验结果

阴性结果:仅质控线(C)有一条红线,检测线(T)无红线出现。

阳性结果:除质控线外,另有一条红线出现在检测线(T)。

无效结果:质控线不出现红线,则结果无效。应更换新的检测试剂盒重复实验。可用剩余的已处理的样品或重新取样。

注意:当检测线很强时,质控线可能相对减弱,此属正常现象。

金标法定性沙眼衣原体快速检测有着快速、方便、准确性高的优点。为临床医生的辅助诊断等节省了很多时间。为市面上沙眼衣原体快速检测的主流。

衣原体阳性症状

出现在约1-3周或数月后,男性衣原体阳性主要表现为尿道内不适,刺痛及烧灼感,并伴有不同程度的尿频、尿急、尿痛,尿痛较淋病为轻。尿道口轻度红肿并有浆液或粘液脓性分泌物,稀薄而量少,长时期不排尿或早晨首次排尿前可见尿道口分泌物污染内裤,并可见尿道口有“糊口”现象;分泌物少时,于晨起挤压尿道才流出少量粘液。合并膀胱炎时可有血尿;无症状性非淋菌性尿道炎,约30-40%病人症状不典型或根本无症状。约1/3左右的淋球菌尿道炎病人合并沙眼衣原体感染,淋病治愈后又出现尿道炎症状,易误诊为慢性淋病或PPNG菌株感染。衣原体阳性表现为附睾肿大,变硬及触痛,多为单侧,部分患者的抗沙眼衣原体抗体升高,可直接从附睾抽吸液中分离出沙眼衣原体;累及睾丸可出现睾丸炎,表现为睾丸疼痛、触痛、阴囊水肿及输精管变硬变粗;累及前列腺时可出现后尿道、会阴及肛门部位钝痛或触痛,可有性功能障碍,直肠镜检可触及有压痛的前列腺。如前列腺明显肿大,可压迫后尿道而出现尿流变细、排尿无力及尿流中断等;本病还可以合并Reiter综合征,即关节炎,结膜炎,尿道炎三联症。

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