高二下册生物菊花的组织培养实验操作知识点

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高二下册生物菊花的组织培养实验操作知识点

(一)制备MS固体培养基

1、配置各种母液

2、配置培养基①定容② 调PH

③培养基的分装3、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌

1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝

(二)外植体消毒

2、消毒：

流水冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上

(三)接种

用70%的酒精喷雾使空气消毒， 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟

1、接种室消毒

2、无菌操作要求

操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。

3、材料的切取和接种

4、接种注意事项

①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为75%的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种

②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3-4块，菊的茎或叶6-8块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件

③插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分

(四)培养

无菌箱中培养，定期消毒，保持适宜的温度，光照

(五)移栽

1、打开封口膜

2、清洗转移至消过毒的蛭石或珍珠岩中幼苗长壮后，移栽到土壤中