饲养层细胞是什么_饲养层细胞的介绍

饲养层细胞的影响，主要体现在饲养层种类、丝裂霉素处理饲养层的时间、饲养层细胞的代数和饲养层细胞的密度等。下面是小编精心为你整理的饲养层细胞的介绍，一起来看看。

饲养层细胞的介绍

饲养层细胞就是指一些特定细胞(如颗粒细胞、成纤维细胞、输卵管上皮细胞等已在体外培养的细胞)，经有丝分裂阻断剂(常用丝裂霉素)处理后所得的细胞单层。一般铺在明胶层上(也可不铺)。饲养层细胞大部分可用MEF(小鼠胚胎成纤维细胞)。

不论ES细胞或EG细胞，原代或初期培养阶段一般都需依赖于能分泌他们在体外存活增殖所必需的生长因子的饲养层细胞。不同类型的饲养层细胞分泌的生长因子略有不同，但都要求培养过程中的饲养层细胞不分裂不增殖而仍保持代谢活性。是细胞培养，尤其是胚胎干细胞培养常用的生长增殖促进剂和分化抑制剂。

饲养层细胞的影响因素

饲养层的影响，主要体现在饲养层种类、丝裂霉素处理饲养层的时间、饲养层细胞的代数和饲养层细胞的密度等。动物种类不同对饲养层种类的要求也不同。

饲养层种类

STO PMEF： 对各种动物都较适宜，，但最可靠的方法还是根据动物种类筛选最佳饲养层为宜。有研究表明，PMEF比STO更适合用于小鼠ES(胚胎干细胞)的培养。

UE(子宫上皮细胞)

BRL(大鼠肝细胞)等

动物种类

需要经过筛选来确定最适宜该种动物ES分离克隆的饲养层

丝裂霉素处理滋养层的时间

目前丝裂霉素(常用有丝分裂阻断剂)处理时间在小鼠成纤维细胞上一般要求为：在37摄氏度，5%二氧化碳饱和温度的条件下处理24h，时间过短达不到预定目的，成纤维细胞不能被成功地抑制住，时间过长则使细胞老化，活性下降，分泌因子的能力降低，从而直接影响ES细胞增殖和分化的抑制。同时处理完的清洗工作也很重要，一般要求用无钙镁PBS冲洗4~5遍，以确保丝裂霉素的彻底清除。

饲养层细胞的代数及密度

以小鼠成纤维细胞为例，选3~5代，密度为10^6-10^7个/ml为宜，代数过低所含杂细胞太多，代数过高则细胞活力降低。