2017高考生物实验总结

2017-02-20

高考生物实验总结

一.化学物质的检测方法

1、淀粉：碘液 (蓝色)。

2、还原性糖：斐林试剂、班氏试剂(沸水浴后生成砖红色沉淀) 。

3、CO2：Ca(OH)2溶液(澄清石灰水变浑浊)。

4、乳酸：pH试纸。

5、O2：余烬复然 ;无O2：火焰熄灭。

6、蛋白质：被蛋白酶水解、双缩脲试剂(紫红色)。

7、脂肪：苏丹Ⅲ染液 (橘黄色)、苏丹Ⅳ染液 (红色)。

8、DNA：二苯胺(沸水浴，蓝色)或甲基绿(染色后，呈绿色)，也可用DNA酶。

9、RNA：吡罗红(呈红色)、苔黑酚乙醇溶液

10、染色体：龙胆紫溶液，醋酸洋红溶液。

二.实验条件的控制方法

1、隔绝气体：密封玻璃容器可用石蜡，隔绝空气与液体可用油膜;排气或充气可依据升温或冷却。

2、增加水中氧气：泵入空气或吹气或放入绿色植物; 减少水中氧气：容器密封或油膜覆盖或用凉开水。

3、除去容器中CO2：NaOH溶液;增加容器中的CO2：NaHCO3溶液。

4、除去叶中原有淀粉：置于黑暗环境。

5、除去叶中叶绿素：酒精水浴加热。

6、析出或溶解物质：水溶性根据溶解度，脂溶性可用丙酮或酒精。

7、除去植物光合作用对呼吸作用的干扰：给植株遮光;

8、如何得到单色光：棱镜色散或透明薄膜滤光。

9、实验中控制温度的方法：

①、还原糖，DNA鉴定：沸水浴加热。

②、酶促反应：水浴保温。

③、用酒精溶解叶中的叶绿素：酒精要隔水加热。

④、细胞和组织培养以及微生物培养：恒温箱培养。

⑤、降温，冷却;升温，加热。

10、维持PH：缓冲溶液(HCO3-/H2CO3-，HPO43-/H2PO42-);降低加酸或生理酸性盐，升高加碱或生理碱性盐。

11、血液抗疑：加入柠檬酸钠(去掉血液中的Ca2+)。

12、线粒体提取：细胞匀浆离心。

13、动物细胞的处理：破裂用清水，细胞的失水用NaCl。注意搅拌。

14、骨无机盐的除去：盐酸溶液。

15、灭菌方法：培养基用高压蒸汽灭菌;接种环用火焰灼烧灭菌;双手用肥皂冼净，擦干后用75%酒精消毒;实验室或接种箱用甲醛蒸汽或紫外灯灭菌;整个过程都在实验室无菌区或酒精灯旁进行。

16、消除叶片中脱落酸的影响：去除成熟的叶片;

17、消除植株本身的生长素：去掉生长旺盛的器官或组织(芽、生长点);

18、补充植物激素的方法：涂抹、喷洒、用含植物激素的羊毛脂膏或琼脂作载体;

19、补充动物激素的方法：口服(饲喂)、注射;

20、阻断植物激素传递：插云母片法。

三.实验结果的显示方法

1、有无某物质的存在：有机物根据颜色反应或凝集，无机物根据变色或生成沉淀。

2、光合速度：O2释放量或CO2吸收量或有机物生成量。

①水生植物可依气泡的产生量或产生速率;

②离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目;

③植物体上的叶片可依指示剂(如碘液)处理后叶片颜色深浅;

④水绵可借助显微镜下好氧性菌的分布情况。

3、呼吸速度：O2吸收量或CO2释放量或有机物消耗量。

4、原子或分子转移途径：放射性同位素标记法或元素示踪法。

5、细胞液浓度大小：质壁分离或U型管+半透膜。

6、细胞吸水和吸收离子的关系：可用KNO3溶液质壁分离及其自动复原。

7、植物细胞是否死亡：质壁分离和复原或细胞质的流动。

8、甲状腺激素：动物耗氧量,发育速度等。

9、生长激素：生长速度(体重、体长变化)。

10、胰岛素作用：动物活动状态(是否出现低血糖症状──昏迷)。

11、血糖的含量：低血糖症状或尿糖是否出现。

12、胰高血糖素作用：尿糖的检测(在尿液中加班氏试剂进行沸水浴，看是否出现砖红色沉淀)

13、生长素作用及浓度高低的显示：可通过去除胚芽鞘后补充生长素后的胚芽生长情况来判断(弯曲、高度)

14、菌量的多少：菌落数，亚甲基蓝褪色程度。

15、菌种：菌落的形态、大小、边缘、高低、颜色、光泽等。

16、大肠杆菌：伊红—美蓝琼脂培养基。

四、实验中常用器材和药品的使用

1、NaOH：用于吸收CO2或改变溶液的pH

2、Ca(OH)2：鉴定CO2

3、CaCl2：提高细菌细胞壁的通透性

4、HCl：解离(15%)或改变溶液的pH

5、NaHCO3：提供CO2、作为酸碱缓冲剂

6、酸碱缓冲剂(Na2CO3/NaHCO3，Na2HPO4/NaH2PO4)：用于调节溶液pH

7、NaCl：配制生理盐水(0.9%)或用于提取DNA(0.14M或2M)

8、琼脂：激素或其他物质的载体或培养基，用于激素的转移或培养基

9、酒精：用于消毒(75%)、提纯DNA(95%)、叶片脱色、配制解离液(95%的冷酒精)及洗去浮色(50%)

10、蔗糖：配制蔗糖溶液，测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原

11、二苯胺：用于DNA的鉴定(沸水浴，蓝色)

12、甲基绿：检测DNA，呈绿色

13、吡罗红：检测RNA，呈红色

14、苔黑酚乙醇溶液：用于RNA的鉴定

15、斐林试剂(甲液0.1g/mL NaOH、乙液0.05g/mLCuSO4)/班氏试剂：鉴定可溶性还原性糖(沸水浴，砖红色沉淀)

16、双缩脲试剂：用于蛋白质的鉴定(紫色)

17、苏丹Ⅲ染液(橘黄色)和苏丹Ⅳ染液(红色)：用于脂肪鉴定

18、碘液：用于鉴定淀粉(变蓝色)

19、龙胆紫溶液或醋酸洋红：碱性染料，用于染色体染色时，前者呈深蓝色，后者呈红色

20、改良苯酚品红染液：检测染色体，红色

21、健那绿B：检测线粒体，专一性让线粒体染色呈蓝绿色

22、重铬酸钾溶液：检测酒精，呈灰绿色

23、溴麝香酚蓝水溶液：检测CO2，由蓝变绿再变黄

24、吲哚酚试剂：用于维生素C的鉴定

25、伊红美蓝：鉴定有无大肠杆菌的存在

26、亚甲基蓝：用于活体染色或检测污水中的耗氧性细菌(细菌的氧化可使之褪色)

27、pH试纸：检验物质的酸碱性，如乳酸

28、卡诺氏固定液：用于细胞有丝分裂根尖的固定

29、解离液(5%盐酸和95%酒精按1：1的比例配成)：有丝分裂中根尖的分离与固定

30、层析液：用于叶绿素的分离，主要类型：

①由20份石油醚(在60～90℃下分馏出来的)、2份丙酮和1份苯混合而成;

②95%的酒精;

③93号汽油;

④9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合;

⑤汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。

31、20%新鲜肝脏研磨液：含有H2O2酶，可促进H2O2分解产生O2

32、无土营养液：用于植物无土栽培

33、柠檬酸钠：血液抗凝剂

34、结晶紫：用于自生固氮菌的分离

35、秋水仙素(C22H25O6N)：用于单倍体育种，作用机理是可抑制植物细胞有丝分裂中纺缍体的形成，可导致细胞内染色体数目加倍。是1937年发现的，是从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的一种植物碱。它是白色或淡黄色的粉末或针状结晶，有剧毒，使用时应特别注意。

36、滤纸：过滤或纸层

37、纱布、尼龙布：过滤，遮光

38、云母片：阻止生长素传递

39、微电流计：测量神经元受刺激时，神经元细胞内或细胞间的兴奋传递情况

五、一些常见的实验方法

1、根据颜色来确定某种物质的存在：

淀粉+I2(蓝色);还原性糖+斐林试剂(砖红色);

脂肪+苏丹Ⅲ(橘黄)或+苏丹Ⅳ(红色);蛋白质+双缩脲试剂(紫色);

大肠杆菌+伊红和美蓝(菌落为深紫色，有金属光泽)。

2、用颜色标记法来确定原肠胚三个胚层的分化情况。

3、用荧光标记法来证明细胞膜具有一定的流动性。

4、同位素示踪法：

光合作用产生氧气的来源;光合作用中二氧化碳的去向;

噬菌体侵染细菌实验证明DNA是遗传物质，蛋白质不是遗传物质;

DNA的复制是半保留复制;泌蛋白的形成过程。

5、确定某种元素为植物生长必需的元素的方法:水培法(完全培养液与缺素完全培养液一次对照，缺素与加进去某元素后二次对照)。

6、获得无籽果实的方法:

用适宜浓度的生长素处理花蕾期已去雄的子房，如无籽蕃茄;

诱导染色体变异，如无籽西瓜;用赤霉素处理如无籽葡萄;无性繁殖获取香蕉。

7、确定某种激素功能的方法：饲喂法，切除注射法，阉割移植法，切除口服法。

8、确定传入、传出神经的功能：刺激+观察效应器的反应或测定神经上的电位变化。

9、植物杂交的方法：

雌雄同花：花蕾期去雄+套袋 +开花期人工授粉+套袋;

雌雄异花：花蕾期雌花套袋+开花期人工授粉+套袋。

10、确定某一显性个体基因型的方法：

测交;该显性个体自交，水稻可用花粉鉴定法。

11、确定某一性状为显性性状或隐性性状的方法：

具有一对相对性状的纯合体的杂交，子一代所表现的一个亲本形状及为显性，

自交，观察后代是否有性状分离，若分离原性状为显性。

12、确定某一性状受核基因还是质基因控制：正反交。

13、确定某一性状基因在常染色体上还是在性染色体上：两亲本杂交的子一代该性状在雌雄两性间比例是否相同，若相同为常染色体，否则在性染色体，或用正反交法。

14、确定某一性状受核基因确定某一个体是否具有抗性基因的方法：

确定小麦是否具有抗锈病基因，用锈病菌去侵染，一段时间后，观察有无锈斑出现。

15、鉴定血型的方法：用标准血清与待测血型混合，在显微镜下观察血液的凝集情况。

16、育种的方法：杂交育种;人工诱变育种;单倍体育种;基因工程育种;细胞工程育种;多倍体育种等。

17、测定种群密度的方法：样方法(植物);标志重捕法(动物);显微计数法(微生物)。

18、生态瓶的制作方法：瓶必须透明，且封闭，放置在散射光下，动物耐受性要强。

19、分离微生物的方法：

平板划线法;用选择培养基培养(如：圆褐固氮菌的分离，金黄色葡萄球菌的分离，细菌和酵母菌的分离);

液体稀释法;

菌丝尖端切割法。

20、测定微生物群体生长的方法：

测定细菌的数目：显微计数或染色涂片计数法(红细胞计数法)。

测定细菌的重量：取一定体积的培养基，经离心分离，反复洗涤后，称湿重，或烘干后称干重。

六、实验研究方法

1、显微观察法：如观察植物细胞有丝分裂的实验，观察植物细胞质壁分离和复原的实验，微生物的群体生长。

2、观察法：观察生物的外在性状和表现等，如观察注射了甲状腺激素的小狗的活动状况，观察动物的毛色和植物花色的遗传实验等。

3、同位素示踪法：如噬菌体侵染细菌的实验，用18O和14C追踪光合作用中氧原子和碳原子转移途径的实验等。

4、加法创意：如用饲喂法研究甲状腺激素的实验、用注射法研究生长激素的实验，用移植法研究性激素的实验等。

5、减法创意：如用阉割法、摘除法研究性激素、甲状腺激素、生长激素的实验，雌蕊授粉后除去发育着的种子实验等。

6、杂交实验法：如孟德尔发现遗传定律的植物杂交、测交的实验，小麦的杂交实验等。

7、化学分析法：如番茄和水稻对Ca 和Si选择吸收的实验，叶绿体中色素的提取和分离实验等。

8、比色法：利用生物组织中的有些有机物和化学试剂互作能产生颜色反应原理。

9、理论分析法：如大小草履虫竞争的实验，植物根向地生长、茎背地生长的实验，植物向光性的实验等。

10、模拟实验法：如渗透作用的实验装置，分离定律的模拟实验等

11、取样调查法：种群密度的测量，微生物代谢进程的监控。

七、实验技术

1、光学显微镜的使用：包括显微镜的取送、放置、旋转、对光(反光镜及光圈的使用)、低倍观察、高倍观察、镜头的擦拭;显微镜的放大倍数(是物体的长和宽，不是面积，也不是体积)、焦距问题、物镜离装片的远近、准焦螺旋的使用、显微镜使用时物象移动方向、显微镜使用时异物的判断(通常通过移动玻片、转动转换器或旋转目镜来判断)。

2、临时装片、切片和涂片的制作：适用于显微镜观察，凡需在显微镜下观察的生物材料，必须先制成临时装片、切片和涂片，如“观察植物细胞的质壁分离和复原”中要制作洋葱表皮细胞的临时装片，在“生物组织中脂肪的鉴定”中要制作花生种子的切片，在“观察动物如人体血液中的细胞”中要制作血液的涂片等等。

3、生物标本的染色技术：把组织浸在染液中，使组织或细胞的某一部分染上与其他部分不同的颜色，产生不同的折射率，使组织或细胞内各部分的构造县得更清楚，便于用光学显微镜观察。如细胞中染色体的染色。

4、研磨，过滤：适用于从生物组织中提取物质如酶、色素等，要求学生熟练掌握研磨、过滤的方法，如研磨时要先将生物材料切碎，然后加入摩擦剂(常用二氧化硅)、提取液和其它必要物质，充分研磨之后，往往要进行过滤，以除去渣滓，所用过滤器具则根据需要或根据试题中提供的器材加以选用，如可用滤纸、纱布、脱脂棉、尼龙布等。

5、解离技术：植物中用解离液或纤维素和果胶酶用于破坏细胞壁，分散植物细胞，制作临时装片，动物中用胰蛋白酶分散细胞。

6、恒温技术：适用于有酶参加的生化反应，一般用水浴或恒温箱，根据题目要求选用。

7、层析技术：适用于溶液中物质的分离。主要步骤包括制备滤纸条、划滤液细线、层析分离等。

8、植物叶片中淀粉的鉴定：适用于光合作用的有关实验，主要步骤包括饥饿处理、光照、酒精脱色、加碘等。

9、根尖培养技术：有丝分裂实验的材料

10、小动物饲养技术：饲养小白鼠等实验动物

11、无土栽培技术：探究植物必需的矿质元素的实验，〈拓展：微生物生长因子的判断的实验〉;植物的无土栽培〈注意溶液浓度和溶解氧〉。

12、微电流测量技术：用于刺激神经元细胞时，兴奋的传递情况。刺激神经元的某一点时，相对于该神经元的刺激点而言，其两侧均有电位变化(用两表则可在两侧任意位置，用一表测定则相对于受刺激点不等距位置有两次偏转)可证明在同一神经元内具有双向传递性;刺激突触前神经元时，突触后神经元可测得电位变化，刺激突触后神经元时，突触前神经元测不到电位变化，可证明突触传递具有单向传递性。

13、pH控制技术：利用缓冲液调节pH，确保实验环境的pH相对稳定。

14、微生物培养技术：包括无菌接种技术，灭菌，培养基的配置，分离菌体，稀释，染色，显微计数，微生物的连续培养技术等。

15、植物组织培养技术：原理过程优点及应用。

16、细胞融合技术：促溶剂杂种细胞遗传特性的判断

17、离心技术：从组织匀浆中分离各种细胞器各种蛋白质核酸等生物大分子。

18、DNA分子杂交技术：目的基因的获取，基因诊断，生物进化中亲缘关系的测定。

19、PCR技术：基因工程中基因文库的建立，体外基因大量的增殖。