试析阿齐沙坦胃漂浮缓释片的制备及体外释放
阿齐沙坦是新一代选择性AT1亚型血管紧张素II受体拮抗剂(ARBs)类抗高血压药。它与血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)类降压药物相比，具有平稳降压、不会引起干咳的优点。尽管已上市的有多个ARBs，但对于许多患者，仅抑制肾素-醛固酮系统(RAS)活性并不足以控制血压和降低心血管疾病及糖尿病的风险。研究显示，阿齐沙坦作为新一代双重功能ARBs，不仅拮抗血管紧张素II的1型受体(AT1受体)，还可能通过多种机制降低心血管疾病及糖尿病的风险[1,2]。2010年4月28日，日本武田制药公司(Takeda)完成了该药物三期临床试验。临床试验证明，本品具有较好疗效，且不良反应发生率较低，依从性较好的特点。胃漂浮滞留型缓释片[3]是一种特殊缓释制剂，口服后能漂浮于胃液之上,同时缓慢释药，从而延长了药物在胃内的滞留时间，使药物在胃及小肠上端的吸收率提高。目前尚未见阿齐沙坦胃漂浮缓释片的相关报道。本实验采用湿法制粒制备了阿齐沙坦胃漂浮缓释片, 并对其体外溶出度等制剂质量进行了初步评价。
1 材料
1.1 仪器
TDP型单冲压片机( 上海天凡药机制造厂);PYC-A型片剂硬度仪(上海黄海药检仪器厂);2RS-8G智能溶出试验仪(天津海益达科技有限公司);UV-2450紫外分光光度计(日本岛津公司)
1.2 试药
阿齐沙坦(浙江台州保隆化工有限公司);羟丙甲纤维素HPMC，MethocelK4M、K15M、K100M，上海卡乐康包衣技术有限公司);低取代羟丙基纤维素(L-HPC，安徽山河药用辅料有限公司);硬脂酸镁(湖南尔康制药股份有限公司);碳酸氢钠(湖北兴银河化学有限公司)。
2 方法和结果
2.1 制备工艺
将原料、HPMC、L-HPC及碳酸氢钠分别过100目筛，按等量递加法混匀，以80%乙醇溶液为粘合剂，采用30目筛制粒，60℃干燥4 h，整粒，加入及硬脂酸镁，混合均匀，压片，硬度控制在10-12 kg。
2.2 质量评价
测定波长的选择 精密称取原药适量，加0.1 mol·ml-1盐酸，以0.1 mol·ml-1盐酸为空白，于200-400 nm波长范围内扫描，在240 nm处有最大吸收峰，且辅料无干扰，故选择240 nm为紫外检测波长。
2.3 体外漂浮性能实验
采用中国药典2010年版附录XC第二法装置，将阿齐沙坦胃漂浮缓释片置37℃的0.1 mol·ml-1盐酸900 ml中，转速50 r·min-1观察缓释片起漂时间和持漂时间T。所制片剂均能在10 min内迅速起漂，持漂时间与处方有关，详见下文。
2.4 释放度试验
2.4.1 标准曲线 精密称取阿齐沙坦对照品10.51 mg，精密称定，置100 ml量瓶中，用0.1 mol·ml-1盐酸溶解并稀释至刻度，摇匀，作为溶液I。精密量取溶液I 2 ml、4 ml、5 ml、6 ml、7 ml，置100 ml量瓶中，用0.1 mol·ml-1盐酸稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，照紫外-可见分光光度法(中国药典2010年版二部附录Ⅳ A)，在240 nm的波长处测定吸收度。以浓度C(µg·ml-1)为横坐标，以吸收度A为纵坐标，进行线性回归。试验结果见表1。
2.4.2 回收率 对照品溶液：精密称取阿齐沙坦对照品10.53 mg置100 ml量瓶中，加0.1 mol·ml-1盐酸适量，振摇使阿齐沙坦溶解，加0.1 mol·ml-1盐酸稀释至刻度，摇匀，精密量取续滤液5 ml，置100ml量瓶中，用0.1 mol·ml-1盐酸稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
2.4.3 供试品溶液 分别按处方量的80%、100%、120%，精密称取阿齐沙坦对照品约8.0 mg、10.0 mg、12.0 mg，每个浓度3份，共9份，分别置100 ml量瓶中，按处方加入辅料，加0.1 mol·ml-1盐酸适量，振摇使阿齐沙坦溶解，加0.1 mol·ml-1盐酸稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 ml，置100 ml量瓶中，用0.1 mol·ml-1盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
分别取上述对照品溶液与供试品溶液，照分光光度法(中国药典2010年版二部附录Ⅳ A)在240 nm的波长处测定吸收度。计算回收率。试验结果见表1。
2.4.4 精密度 取线性关系试验项下浓度为5.255 µg·ml-1的溶液，作为供试品溶液，照分光光度法(中国药典2010年版二部附录Ⅳ A)在240 nm的波长处连续测定吸收度6次并记录，试验结果见表1。
2.4.5 溶液稳定性 取溶出度测定项下的溶液，分别于0、1、2、4、6小时按溶出度方法测定，考查溶液稳定性，结果表明，本法线性、精密度、回收率及溶液稳定性均良好。
2.4.6 测定方法 取本品，照释放度测定法(中国药典2010年版二部附录ⅩC第二法)，转速50 r·min-1，以0.1 mol·ml-1盐酸900 mL为出介质，温度37℃。依法操作，定时取样(同时补充同温等量的相应介质)，精密量取续滤液5ml，置50ml量瓶中，用溶出介质稀释至刻度，摇匀作为供试品溶液;另精密称取阿齐沙坦对照品适量，用0.1 mol·ml-1盐酸定量稀释制成每1ml中约含4μg的溶液。取上述两种溶液，照紫外-可见分光光度法(中国药典2010年版二部 附录Ⅳ A)，在240nm波长处分别测定吸光度，分别计算不同时间的累积释放度。
2.5 不同因素对片剂体外释放和漂浮性能的影响
2.5.1 HPMC规格的选择 采用“2.1制备工艺”项下工艺制备片剂，分别考察以HPMCK4M(4000 mPa·s)、K15M(15000 mPa·s)、K100M(100000 mPa·s)为骨架材料对体外释放度的影响，用量均为110 mg/片，结果见图1。
图1 HPMC不同规格的影响 (n=3)
结果表明随着HPMC黏度增加，释药速度减慢，同时随着黏度的增加，加漂浮性能略有增强，为提高缓释和漂浮效果，选择规格为K100M为骨架材料。
2.5.2 HPMC K100M用量的选择 选择规格为K100M为骨架材料，分别考察90mg/片、110mg/片、 130mg/片不同用量对释放度的影响，结果见图2。
图2 HPMC K100M用量的影响 (n=3)
由以上结果可知，随着HPMCK100M用量增加，释药速度减慢，且 3个用量间存在显著性差异(P>0.05)。漂浮性能研究表明，当K100M用量增为110mg/片时持漂时间约为7.5 h，综合考虑制备过程控制HPMC K100M的用量110mg/片。
2.5.3 碳酸氢钠用量对释放的影响 分别将处方中碳酸氢钠用量调节为150mg/片，200mg/片，250mg/片，其它辅料和制备方法不变，比较片剂体外释药情况(图3)。
图3 碳酸氢钠用量对释放的影响(n=3)
结果表明，所选3个用量间有显著性差异(P>0.05)。漂浮性能研究表明，碳酸氢钠用量增大漂浮性能不断增强，所选3个用量间有显著性差异(P>0.05)，150mg/片持漂时间T为5.3 h，这可能是因为碳酸氢钠用量用量低时易耗竭的缘故。制备过程控制碳酸氢钠用量为200mg/片。
2.5.4 低取代羟丙基纤维素用量对释放的影响 分别将处方中低取代羟丙基纤维素用量调节为50mg/片，100mg/片，150mg/片，其它辅料和制备方法不变，比较片剂体外释药情况(见图4)。
图4 低取代羟丙基纤维素用量对释放的影响(n=3)
结果表明，低取代羟丙基纤维素用量增大会导致释药速度加快，制备过程控制低取代羟丙基纤维素用量为100mg/片。
2.5.5 片剂处方的确定
将上述处方按2.1所述压片，体外漂浮性能测定表明，约1min后片剂表面形成一层凝胶屏障，并保持片剂形状，漂浮于液面。随时间延长片剂体积逐渐增加，但仍保持片形完整，持漂时间为7.2 h。
3 影响因素试验
采用铝塑复合膜包装，将自制样品片直接放置于下述条件下：60 ℃(高温);相对湿度92.5%(高湿);照度4500 lx(强光)。分别于0、5、10 d取样，试验结果间表2。
表2 影响因素考察实验结果(n=3)
Tab2 Results of stability experiments of sample
光照、高温(60℃)及高湿(92.5%)试验结果表明，高温(60℃)及高湿(92.5%)5天、10天外观、释放度、含量基本没有变化，高温10天有关物质略有升高，光照试验各考察指标均为明显变化。因此为保证本品稳定性，采用双面铝塑复合膜包装。
4 讨论
本实验中湿法制粒压片，处方中使用的HPMC为亲水性骨架材料，遇水后可形成凝胶层起到缓释作用，而碳酸氢钠遇酸(胃液)能够迅速反应产生二氧化碳起到起漂作用，使药物保持在胃中缓慢释放。本处方中低取代羟丙基纤维素作为崩解剂，对促进片剂释放起到了良好调节作用。本实验所选用了传统工艺、成本较低，容易实现产业化生产。
参考文献
[1] Kathy Zaiken, PharmD, Judy W.M. Cheng etc. Azilsartan Medoxomil: A New Angiotensin Receptor Blocker. Clinical Therapeutics,2011,33(11):1577-1589
[2] Keiji Kusumoto, Hideki Igata, Mami Ojima etc. Antihypertensive, insulin-sensitising and renoprotective effects of a novel, potent and long-acting angiotensin II type 1 receptor blocker, azilsartan medoxomil, in rat and dog models. European Journal of Pharmacology,2011,669(1-3):84-93
[3] 杨训, 胡连栋. 盐酸环丙沙星胃漂浮缓释片的制备及体外释放. 中国医药业杂志，2007，38(11):776-779